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倒平板小技巧

时间:2022-01-13 点击次数:100

       在生物实验中经常需要倒平板,初学者往往倒不好,导致后继实验出现问题。今天,小施总结几点倒平板小技巧供大家参考。

 培养基倾注温度

1、培养基倾注适宜温度约45℃。如果手心接触装培养基的三角瓶不烫,手背接触烫,此时的温度在45度左右,适合倒平板。培养基倾注时温度太高的话,凝固时间较长,另外皿盖上会有大量冷凝水,不利于后续实验。温度太低,则容易出现倒板过程中瓶中培养基部分凝固的现象。如果要连续倒多个皿,尤其是在冬天,非常容易凝固,一旦凝固则需要再加热到较高温度才能溶化。所以建议此时开个50度的恒温水浴,随时可把装培养基的三角瓶放进去加热,效果会更好。

2、有些培养基需要加入添加成分,这些添加成分在加入前应先放置到室温,避免冷的液体造成琼脂凝结或形成片状物。

3、目前多数实验室培养基灭菌后会放置水浴或者烘箱中,需使用的时候拿出来直接倒板。但培养基静置时间不宜过长,静置时间一般不超过4小时。静置时间过长,培养基中琼脂可能会少量凝固,形成类似絮状析出。

培养皿中有冷凝水

培养皿中有冷凝水,如果只有几滴,则影响不大,如果过多则需要引起注意。

1、倒皿前将平皿最好保持在35℃-40℃的温度(触手有温热感)。

2、当需要表面接种时,有冷凝水的平板表面容易产生蔓延菌落。这时可放在有对流的无菌净化台中吹干培养基表面,但不能过度干燥,否则培养过程中平板容易开裂。 
3、如果是进行倾注平板计数,则可在凝固后的琼脂表面再覆盖一薄层琼脂培养基即可。

平板倾注量

一般平板倾注量在18-20mL左右,如果培养时间超过48小时或者是培养温度高于40℃,为防止水分过量蒸发导致平板开裂,倾注量一般是25mL左右。倾注平皿时左三圈、右三圈的轻轻晃动,注意避让平皿盖。

平板气泡

倒板过程中容易出现气泡,特别是像BS琼脂这类需要摇匀后倒板的培养基。气泡过多的话会影响结果观察,所以在实验操作中尽量避免或减少气泡。

1、加热时培养基融化即可,避免温度过高产生气泡。

2、倒平板时尽量贴着平皿壁缓慢倒入,将气泡留在瓶子底部。

3、如果平板中有少量气泡的话,可以把气泡轻摇到平板壁上,这样不会影响结果观察。

      有实验小伙伴说,倒平板我不怕,但是洗平板真的很绝望啊!

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